روش نمونه گیری سالک
طرز صحیح نمونه گیری از زخم سالک
لبه های ملتهب و متورم ضایعه مهم ترین قسمتی است که بیشترین تراکم آماستیگوت ها را به همراه دارند. نکته مهم آنکه هر چه نمونه بیشتری از بافت برداشت شود احتمال وجود انگل در نمونه بیشتر است.
از آنجایی که ضایعات پوستی ممکن است دچارعفونت های ثانویه باکتریایی و یا قارچی شده باشند، لازم است محلی از ضایعه را که قصد برداشت نمونه از آن وجود دارد ، کاملاً تمیز نموده و اگر لازم باشد چندین مرتبه پنبه الکل عوض گردد . نمونه برداری و رنگ آمیزی به روش زیر صورت می گیرد:
۱-پوشیدن دستکش در هر بار نمونه گیری
2- برداشت کبره های روی ضایعه و هر گونه چرک روی آن
۳- انتخاب محل مناسب برای نمونه برداری شامل لبه خارجی قسمت متورم و ملتهب ضایعه و اجتناب از نمونه برداری از محل های باز و زخمی ضایعه
4-استفاده از اتانول 70 درجه برای استریل کردن و شستشوی ضایعه : قبل از نمونه برداری باید صبر کرد که الکل خشک شود.
5- از به کار بردن موادی مانند مرکورکوروم در محل ضایعه بایستی اجتناب گردد. زیرا ممکن است باعث مرگ آماستیگوت و یا تغییر شکل آنها شود. در صورت استفاده از ترکیبات ید دار برای ضدعفونی ضایعه ، قبل از نمونه برداری محل ضایعه بایستی به کمک پنبه آغشته به الکل ، از این ماده پاک شود .
6- محلی از ضایعه که برای نمونه برداری در نظر گرفته شده است بایستی توسط دو انگشت شست و سبابه محکم گرفته شود.
۷- با استفاده از واکس استیل استریل و یا یک اسکالپل استریل نوک باریک، شکافی به عمق یک میلیلیتر در منطقه ای که با انگشتان گرفته شده ایجاد گردد.
۸- توسط لبه تیز اسکالپل یا واکس استیل، از عمق محل شکافته شده به طرف سطح و مرکز ضایعه چند خراش برای برداشت مقدار مناسب بافت و خونابه داده شود.
9- اسکالپل را بیرون آورده و از مواد روی آن حداقل 3 اسمیر تهیه کنید و مشخصات بیمار با قلم الماس روی لام ها حک شود ( در صورت نیاز به کشت، در کنار شعله ابتدا نمونه به محیط کشت منتقل شود).
روش رنگ آمیزی با گیمسا:
رنگ گیمسا بصورت محلول تجارتی غلیظ به فروش می رسد. این محصول می تواند کاملا متفاوت باشد لذا هر نمونه قبل از استفاده مورد آزمایش قرار گیرد. بطور معمول اگر رنگ پذیری گلبول های سفید و قرمز خون کافی باشد، میتوان فرض نمود که رنگ برای نشان دادن انگل مناسب است. روش رنگ آمیزی به ترتیب زیر است:
1-اجازه داده شود تا نمونه ها بدون استفاده از شعله و در هوای اتاق ، خشک شوند.
2- سپس بر روی لام متانول 70 درجه به مدت 30 تا 60 ثانیه ریخته شود.
3- لام در هوا خشک شود.
4- لام ها را روی پل رنگ آمیزی قرار داده رنگ آمیزی کنید.